Abstract

Metalotionin (MT ) merupakan protein pengikat logam berberat molekul rendah dan kaya dengan sistein yang hadir dalam pelbagai jenis organisma termasuklah bakteria, kulat, tumbuhan dan haiwan. MT tumbuhan dipercayai mengambil bahagian dalam metabolisme dan penyahtoksikan logam dengan cara pengkelatan ion-ion logam berat. Fungsinya yang unik ini telah mendorong minat untuk memencilkan gen MT daripada rumput sambau, Eleusine indica. DNA pelengkap (cDNA) eiMT 1 telah diklonkan ke dalam vektor binari pBI121 untuk ditransformasikan ke dalam pokok tembakau melalui perantaraan Agrobacterium tumefaciens. Penyaringan pokok tembakau transgenik dengan PCR dilakukan menggunakan 3 pasang pencetus yang direka khas iaitu pasangan CMT F dan CMT R, 35SF dan PMT R, dan pasangan pencetus khusus-gen MT FS2 dan MT RS2. Ketiga-tiga pasangan pencetus ini berjaya menghasilkan saiz serpihan DNA jangkaan iaitu masing-masing 270 pb, 1.1 kb dan 170 pb. Penjujukan terhadap serpihan bersaiz 170 pb dan analisis jujukan menunjukkan persamaan 100 % dengan eiMT 1. Kajian pengekspresan gen melalui pendekatan transkripsi berbalik-PCR membuktikan bahawa transgen eiMT 1 telah berjaya diekspreskan dalam 11 daripada 19 pokok transgenik yang dikaji.